技術文章
TECHNICAL ARTICLES原代細胞生物學從哪幾個方面學習*、認識原代細胞生物學課程的重要性,正如原子是物理性質的zui小單位,分子是化學性質的zui小單位,細胞是生命的基本單位。50年代以來諾貝爾生理與醫學獎大都授予了從事細胞生物學研究的科學家,可見細胞生物學的重要性。如果你將來打算從事生物學相關的工作,學好細胞生物學能加深你對生命的理解。第二、明確細胞生物學的研究內容,即:結構、功能、生活史。生物的結構與功能是相適應的,每一種結構都有特定的功能,每一種功能的實現都需要特定的物質基礎。如肌肉可以收縮、...
原代細胞HEPES緩沖液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養液中,再過濾除菌。每1000ml培養液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH調pH至7.2,濾過除菌后使用。原代細胞此時HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L),使用前取99ml培養液加入lml貯存液,zui終應用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中,用...
培養原代細胞無菌操作注意事項1、操作原代細胞進行培養時,動作要準確敏捷,但又不必太快,以防空氣流動,增加污染機會。不能用手觸及已消毒器皿,如已接觸,要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便,工作臺面上的用品要有合理的布局,原則上應是右手使用的東西放置在右側,左手用品在左側,酒精燈置于中央。工作由始至終要保持一定順序性,組織或細胞在未做處理之前,勿過早暴露在空氣中。同樣,培養液在未用前,手或相對較臟的物品不能經過開放的瓶口上方,瓶口zui易污染,加液時如吸管尖碰到瓶口,則應將吸...
細胞系活性檢測方法之乳酸脫氫酶(LDH)釋放法LDH是活細胞漿內酶,當細胞損傷,細胞膜通透性變化時,會將LDH釋放到培養液中。因此培養液中該酶的活性與被裂解的細胞系數量成正比。由LDH催化的酶促反應在催化乳酸生成丙酮酸的過程中使氧化型輔酶I(NAD)變成還原型輔酶I(NADH+H),后者再通過遞氫體一吩嗪二甲酯硫酸鹽(PMS)還原碘硝基氯化四氯唑(INT),INT接受氫離子被還原成紫紅色的化合物,酶標儀檢測其OD值。與結晶紫染色法和MTT比色法進行靈敏度、重復性和相關性比較,...
原代細胞取材的基本要求和注意事項人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件,是進行細胞培養的*步,若取材不當,將會直接影響細胞的體外培養,現將取材的基本要求和注意事項敘述如下:一、取材的基本要求(1)取材要注意新鮮和保鮮新鮮組織易于培養成功,取材時應盡量在4~6h內能制作成細胞,盡快入箱培養,若不能即時培養,應將組織浸泡于培養液內,于4℃存放。若組織塊較大,應在清除表面血、壞死組織、脂肪和結締組織后,切碎于培養液內4℃存放,但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、淋...
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