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原代細胞
兔原代細胞
YS-01X7957兔腎小球內(nèi)皮細胞圖片





產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品名稱 | 兔腎小球內(nèi)皮細胞圖片 | 英文名稱 | Rabbit Glomerular Endothelial Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7957 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 兔腎小球內(nèi)皮細胞
組織來源 腎組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 兔腎小球內(nèi)皮細胞分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及護酸堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌的降解場所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構(gòu)造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管,匯流入靜脈,而是流入出球小動脈。在腎小球內(nèi),微血管受到高壓,而加速了超濾作用(hyperfiltration)的進行。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后,形成濾液,滲入鮑氏囊內(nèi)。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體,腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內(nèi)皮細胞是類特殊微血管類型的細胞。細胞為圓形、多角形,單層貼壁生長;細胞質(zhì)豐富,細胞核為圓形或卵圓形。腎小球內(nèi)皮細胞被覆于腎小球毛細血管壁腔側(cè),與血流直接接觸,是腎小球濾過膜的道屏障,可粘附細菌和白細胞,修復基底膜,并有抗凝、抗血栓的作用;所以,體外培養(yǎng)的腎小球內(nèi)皮細胞在免疫學和病理生理學領域中具有重要的研究價值。
方法簡介 實驗室分離的兔腎小球內(nèi)皮細胞采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化,結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔腎小球內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、多聚-L-賴溶液(1×)或多聚-L-賴溶液(10×)或明膠包被液(1 mg/mL) 、PBS 、培養(yǎng)基
包被條件: PLL(0.1 mg/mL)或明膠(0.1%)
培養(yǎng)基: 兔腎小球內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細胞形態(tài): 內(nèi)皮細胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳2-3代
消化液: 0.25%
原代細胞培養(yǎng)步驟:

取材與預處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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