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原代細(xì)胞
兔原代細(xì)胞
YS-01X7949兔骨骼肌成纖細(xì)胞圖片





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 兔骨骼肌成纖細(xì)胞圖片 | 英文名稱 | Rabbit Skeletal Muscle Fibroblasts |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X7949 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 兔骨骼肌成纖細(xì)胞
組織來源 骨骼肌組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡介 兔骨骼肌細(xì)胞分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖為長柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進(jìn)行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖。每肌原纖都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有條較明亮的線稱H線。H線的中部有M線。明帶中間,有條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做個肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞也稱橫紋肌細(xì)胞,細(xì)胞呈纖狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方,細(xì)胞多呈梭行,具有定的方向性。
方法簡介 實驗室分離的tu骨骼肌成纖細(xì)胞采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實驗室分離的兔骨骼肌成纖細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑: 0.25% 、PBS 、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基: 兔骨骼肌成纖細(xì)胞培養(yǎng)基(基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含F(xiàn)BS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液次
生長特性: 貼壁
細(xì)胞形態(tài): 成纖細(xì)胞樣
傳代比例: 1:2
傳代特性: 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液: 0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

取材與預(yù)處理?:取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液?。
培養(yǎng)方法?:

原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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