細胞簡介：

產品名稱 人子宮肌瘤組織源細胞

組織來源 子宮肌瘤組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 人子宮肌瘤組織源細胞分離自子宮肌瘤組織；子宮肌瘤是女性生殖器官中常見的一種良性腫瘤，也是人體中常見的腫瘤之一，又稱為纖肌瘤、子宮纖瘤。由于子宮肌瘤主要是由子宮平滑肌細胞增生而成，其中有少量纖結締組織作為一種支持組織而存在，故稱為子宮平滑肌瘤較為確切。簡稱子宮肌瘤。有關子宮肌瘤的病因迄今仍不十分清楚，可能涉及到正常肌層的細胞突變、性及局部生長因子間的較為復雜的相互作用。根據大量臨床觀察和實驗結果表明子宮肌瘤是一種依賴性腫瘤。雌是促使肌瘤生長的主要因素，還有學者認為生長（GH）與肌瘤生長亦有關，GH能協同雌促進有絲分裂而促進肌瘤生長，并推測人胎盤催乳素（HPL）也能協同雌促有絲分裂作用，認為妊娠期子宮肌瘤生長加速除與妊娠期高環境有關外，可能HPL也參加了作用。此外卵巢功能、代謝均受高級神經中樞的控制調節，故神經中樞活動對肌瘤的發病也可能起重要作用。因子宮肌瘤多見于育齡、喪偶及生活不協調的婦女。長期生活失調而引起盆腔慢性充血也可能是誘發子宮肌瘤的原因之一。總之，子宮肌瘤的發生發展可能是多因素共同作用的結果。子宮肌瘤通常含有過多的細胞外介質，其中主要含有成纖細胞及其產生的膠原蛋白I型和III型等，肌瘤細胞與成纖細胞以及各種生長因子發生相互作用，為肌瘤形成和生長提供了適宜的微環境。目前分子生物學研究認為，子宮肌瘤是由單克隆平滑肌細胞增殖而成，多發性子宮肌瘤是由不同克隆細胞形成的。是否上述所述因素在不同克隆形成中起到不同的作用尚不清楚。

方法簡介 實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的人子宮肌瘤組織源細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品信息：

培養信息：

自備試劑： 0.25% 、PBS 、培養基

培養基： 人子宮肌瘤組織源細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 梭形、多角形

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3-5代左右；3代以內狀態佳

消化液： 0.25%

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉入液氮?。

公司正在出售的產品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。