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原代細(xì)胞的質(zhì)量要求

更新時(shí)間:2017-11-21點(diǎn)擊次數(shù):523

原代細(xì)胞隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和生活水平的不斷提高對(duì)生物醫(yī)藥產(chǎn)品的質(zhì)量要求也越來(lái)越高,所以對(duì)制備工藝中所涉及到的各種原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求也越來(lái)越高,特別是對(duì)用于細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要天然成份――牛血清的質(zhì)量要求也不斷提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。
    對(duì)牛血清的質(zhì)量要求:Gibco 和Sigma二家主要的美國(guó)牛血清供應(yīng)商的牛血清都已進(jìn)入到我國(guó)市場(chǎng),他們對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求都極為嚴(yán)格,從血清來(lái)源到產(chǎn)品質(zhì)量都有明確規(guī)定。

    1) 血清來(lái)源:可從世界各國(guó)收集胎牛血清,但是必須符合他的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)農(nóng)業(yè)部進(jìn)口要求。地方當(dāng)局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,有說(shuō)明血清質(zhì)量的證明資料:包括收集過(guò)程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況。

    2)血清的收集:胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個(gè)月內(nèi))血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業(yè)的標(biāo)準(zhǔn):低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。

    3)血清的制備:
    a. 超低IgG胎牛血清:通過(guò)親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBS γ球蛋白含量減到zui低,一般IgG≤5ug/ml,生物學(xué)活性不變。

    b. 血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/過(guò)氧化酶方法測(cè)定)。

    c. γ-射線照射:已經(jīng)證明γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30~45KG。而且這個(gè)劑量的γ-射線照射不會(huì)改變血清的理化性質(zhì)和對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響。

    4)原代細(xì)胞除菌過(guò)濾:經(jīng)過(guò)上述處理的粗制血清再經(jīng)過(guò)一系列除菌濾膜過(guò)濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要通過(guò)三層0.1微米濾膜,其他血清可通過(guò)0.2微米濾膜。
Betulinic acid    白樺脂酸    HPLC≥98%    20mg/支
Prim-o-glucosylcimifugin    升麻素苷    HPLC≥98%    20mg/支
cimifugin    升麻素    HPLC≥98%    20mg/支
acteoside    類(lèi)葉升麻苷(麥角甾苷)    HPLC≥98%    20mg/支
Isoacteoside    異類(lèi)葉升麻苷(異麥角甾苷)    HPLC≥98%    20mg/支
Echinacoside    松果菊苷    HPLC≥98%    20mg/支
4’-O-glucopyranosyl-5-O-    5-O-甲基維斯阿米醇苷    HPLC≥98%    20mg/支
methylvisamminol            
Cephaeline hydrochloride    鹽酸吐根酚堿    HPLC≥98%    20mg/支
Jatrorrhizine Hydrochloride    鹽酸藥根堿    HPLC≥98%    20mg/支
Chelerythrine    白屈菜紅堿    HPLC≥98%    20mg/支
原代細(xì)胞

 

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