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產品簡介
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ARTICLES商品屬性:

產品名稱 | 人外周血巨噬細胞品牌 | 英文名稱 | Human Peripheral Blood Macrophages |
產品規格 | 5×10^5 | 貨號 | YS-01X8306 |
產品信息:

產品名稱 人外周血巨噬細胞
組織來源 外周血
產品規格 5×10^5Cells/T25
細胞簡介 人外周血巨噬細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養,難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內的白血球,源自單核細胞,而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞,在脊椎動物體內參與非特異性防衛(先天性免疫)和特異性防衛(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細胞,令其對病原體作出反應。
方法簡介 實驗室分離的人外周血巨噬細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細胞因子誘導法制備而來,細胞總量約為5×10? cells/瓶。
質量檢測 實驗室分離的人外周血巨噬細胞經CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:

自備試劑: (12 mM) 、PBS 、培養基
培養基: 人外周血巨噬細胞培養基(含FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率: 每2-3天換液一次
生長特性: 貼壁
細胞形態: 巨噬細胞樣
傳代比例: 不傳代
傳代特性: 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液:(12 mM)
人外周血巨噬細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
原代細胞培養步驟:

取材與預處理?:取新生24小時內Wistar大鼠,麻醉后無菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后重懸接種?。
?培養?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養基,37℃、5% CO?培養,24小時后換液?。
培養方法?:

原代細胞培養?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過濾。
通過IgG吸附法去除未貼壁細胞,離心后接種于培養皿。
37℃、5% CO?培養,24小時后換液。
?注意事項?:消化時間需嚴格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過度消化導致細胞死亡。
?細胞系培養?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養。
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