商品屬性：

產品信息：

產品名稱 人外周血B淋巴細胞

組織來源 外周血

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 人外周血B淋巴細胞分離自外周血；B淋巴細胞的祖細胞存在于胎肝的造血細胞島中，此后B淋巴細胞的產生和分化場所逐漸被骨髓所代替。B淋巴細胞簡稱B細胞，成熟的B細胞主要定居于淋巴結皮質淺層的淋巴小結和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結內。B細胞在抗原刺激下可分化為漿細胞，漿細胞可合成和分泌抗體（免疫球蛋白），主要執行機體的體液免疫。與T淋巴細胞相比，它的體積略大。這種淋巴細胞受抗原刺激后，會增殖分化出大量漿細胞。漿細胞可合成和分泌抗體并在血液中循環。從骨髓來的干細胞或前B細胞，在遷入法氏囊或類囊器官后，逐步分化為有免疫潛能的B細胞。成熟的B細胞經外周血遷出，進入脾臟、淋巴結，主要分布于脾小結、脾索及淋巴小結、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小結中，受抗原刺激后，分化增殖為漿細胞，合成抗體，發揮體液免疫的功能。

方法簡介 實驗室分離的人外周血B淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法結合磁珠分選制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的人外周血B淋巴細胞經CD19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基： 人外周血B淋巴細胞培養基(基礎培養基，含IL-2、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 懸浮

細胞形態： 圓形

傳代比例： 不傳代

傳代特性： 不建議傳代

人外周血B淋巴細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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