商品屬性：

產品信息：

產品名稱 人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）

組織來源 滑膜組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）分離自滑膜組織；滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構，各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構，同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎（OA）以關節軟骨退行性變為特征，其病理改變累及關節的各個組成部分，但絕不僅局限于軟骨，還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響，相互作用，共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的細胞群體，是維持關節正常功能的重要組織結構，它包埋在顆粒狀無定性的基質中，基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型（巨噬樣滑膜細胞）、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成。類風濕關節炎（RA）是一種病因未明的慢性、以炎性滑膜炎為主的系統性疾病。其特征是手、足小關節的多關節、對稱性、侵襲性關節炎癥，經常伴有關節外器官受累及血清類風濕因子陽性，可以導致關節畸形及功能喪失。RA的發病可能與遺傳、感染、性激素等有關。RA關節炎的病理主要有滑膜襯里細胞增生、間質大量炎性細胞浸潤，以及微血管的新生、血管翳的形成及軟骨和骨組織的破壞等。體外培養人類風濕關節炎滑膜成纖維細胞對于研究類風濕關節炎疾病的發生機理、治療具有重要意義。退行性骨關節病又稱骨關節炎（OA）、退行性關節炎、老年性關節炎、肥大性關節炎，是一種退行性病變，系由于增齡、肥胖、勞損、創傷、關節先天性異常、關節畸形等諸多因素引起的關節軟骨退化損傷、關節邊緣和軟骨下骨反應性增生。本病多見于中老年人群，好發于負重關節及活動量較多的關節（如，頸椎、腰椎、膝關節、髖關節等）。過度負重或使用這些關節，均可促進退行性變化的發生。臨床表現為緩慢發展的關節疼痛、壓痛、僵硬、關節腫脹、活動受限和關節畸形等。

方法簡介 實驗室分離的人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）采用混合酶消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養基

培養基： 人滑膜成纖維細胞（骨性關節炎）培養基(含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 成纖維細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3-5代左右

消化液：0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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