商品屬性：

產品信息：

產品名稱 人肝星狀細胞

組織來源 肝臟組織

產品規格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 人肝星狀細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星狀細胞（HSC）又名肝貯脂細胞、貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等，是肝臟細胞外基質的主要來源。HSC在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞，各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細胞。正常情況下，HSC處于靜止狀態，當肝臟發生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時，HSC的表型由靜止型轉變為激活型，激活的HSC可通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成及肝內結構的重建，此過程也是肝纖維化的中心環節。肝星狀細胞分布于肝臟的Disse間隙內，是合成、分泌細胞外基質的主要來源，在肝纖維化的發生中處于重要地位。肝星狀細胞是肝臟的間充質細胞，約占肝臟細胞總數的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群，肝星狀細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分，合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構，還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環調節。此外，肝星狀細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。

方法簡介 實驗室分離的人肝星狀細胞采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質量檢測 實驗室分離的人肝星狀細胞經α-SMA或Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養基

培養基： 人肝星狀細胞培養基(含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態： 成纖維細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3代左右

消化液：0.25%

原代細胞培養步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養基，37℃、5% CO?培養，24小時后換液?。

培養方法?：

原代細胞培養?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養皿。

37℃、5% CO?培養，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養。

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