培養人類胚胎腫瘤細胞的研究者們發現，核型正常的細胞在植板（plating）之后只有少數能夠分裂，而且它們的子細胞還會出現持續性的死亡，很少能形成可以長期增殖的克隆。

Sheffield大學的Peter Andrews教授和Daniel Coca教授領導研究團隊，對單個人類胚胎干細胞進行了延時成像，并由此鑒定了限制干細胞生長的主要瓶頸。研究顯示，在長期培養過程中發生了適應性突變的干細胞，受到的生長限制有所緩解，能夠進行更有效的擴增。

Sheffield大學的Dr Ivana Barbaric說：“我們研究胚胎干細胞，是因為它們有成為任何細胞類型的潛力。通過體外培養獲得大量未分化的胚胎干細胞，是用這些細胞進行治療的前提。問題是這些細胞在體外培養時容易大量死亡，擴增效率比較低。”

“在長期體外培養的條件下，胚胎干細胞能夠通過自發突變，提高自己的生長能力。為了安全使用這些細胞進行治療，我們需要了解培養條件對細胞的影響，以及細胞對此做出的適應。”

研究人員將延時顯微成像、單細胞追蹤技術和數學模型結合起來，對普通胚胎干細胞和已經適應培養的干細胞進行了比較。他們從中確定了影響克隆形成的三個主要瓶頸：植板后的細胞生存情況、細胞進入有絲分裂的情況、以及分裂后的細胞死亡情況。

研究顯示，在同樣的培養條件下，已經適應培養的腫瘤細胞在上述三個方面表現更好，能夠形成更多的克隆。此外，增加細胞間的接觸或者添加促進細胞生存的化合物，也能緩解這三方面的問題。
5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物;5,5-二甲基-1-氧化吡咯啉    3317-61-1    CAS號：    5,5-DiMethyl-1-pyrroline-N-oxide;DMPO    英文名稱：
5,6,7,8-四氫-2-萘酚;β-四氫萘酚    1125-78-6    CAS號：    5,6,7,8-Tetrahydro-2-naphthol;β-Tetralol;2-Tetralol;6-Hydroxy-1,2,3,4-tetrahydronaphthalene;6-Hydroxytetralein    英文名稱：
5,6-二甲基苯并咪唑    582-60-5    CAS號：    5,6-DiMethylbenziMidazole    英文名稱：
5，7，4’－三羥基黃酮(-20℃)    520-36-5    CAS號：    Apigenin    英文名稱：
5.7-二羥基-4-甲氧基黃酮    480-44-4    CAS號：    Acacetin    英文名稱：
5’-脫氧-5’-甲硫腺苷(-20℃)        CAS號：    NA    英文名稱：
501鍵合型硅膠擔體        CAS號：    NA    英文名稱：
腫瘤細胞