細胞簡介：

產(chǎn)品名稱 小鼠腓腸肌細胞

組織來源 骨骼肌組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 小鼠腓腸肌細胞分離自小腿肌肉組織；腓腸肌位于小腿后面的皮下，是個淺表的肌肉，當人體站立時，可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌。腓腸肌為小腿后側(cè)群淺組肌肉，有內(nèi)、外二頭，內(nèi)側(cè)頭起自股骨內(nèi)側(cè)髁上的三角形隆起，外側(cè)頭起自股骨外側(cè)髁的近側(cè)端，在二頭的深面各有滑膜囊。腓腸肌的二肌腹增大，在腘窩下角彼此鄰近，所成夾角多為25-30°，此肌下行與比目魚肌移行為跟腱，止于跟骨結(jié)節(jié)。腓腸肌的動脈發(fā)自腘動脈、靜脈與動脈伴行，注入腘靜脈或小隱靜脈。腓腸肌的神經(jīng)全部來自脛神經(jīng)。包括內(nèi)、外側(cè)肌神經(jīng)。腓腸肌在行走及站立時能提足跟向上，直立時，腓腸肌和比目魚肌都參加強固膝關節(jié)，并調(diào)節(jié)小腿和足的位置。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕，可以切取腓腸肌內(nèi)側(cè)頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉(zhuǎn)。腓腸肌還可影響足的縱弓，該肌癱瘓或時，足縱弓將加深。該肌由脛神經(jīng)支配，股骨髁上骨折時，因腓腸肌收縮遠側(cè)端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的塊肌肉。腓腸肌細胞屬于骨骼肌細胞的種，骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖。每肌原纖都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有條較明亮的線稱H線。H線的中部有M線。明帶中間，有條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段，叫做個肌節(jié)。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

方法簡介 實驗室分離的小鼠腓腸肌細胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的小鼠腓腸肌細胞經(jīng)α-Sarcomeric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品信息：

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25% 、 多聚-L-賴溶液（1×）或多聚-L-賴溶液（10×） 、PBS 、培養(yǎng)基

包被條件： PLL（0.1 mg/mL）

培養(yǎng)基： 小鼠腓腸肌細胞 培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 成纖細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳3-5代左右

消化液： 0.25%

凍存步驟：

凍存前準備?

確保細胞處于對數(shù)生長期，密度達80%-90%?。

配制凍存液：推薦50%基礎培養(yǎng)基+40%FBS+10%DMSO?。

?細胞處理?

棄去培養(yǎng)上清，用PBS潤洗1-2次?。

加入消化后，用含血清的培養(yǎng)基終止消化。

?凍存操作?

離心（1000RPM，3-4分鐘）后棄上清，用凍存液重懸細胞?。

分裝至凍存管（每管1mL，細胞數(shù)100-400萬）?。

4℃靜置10分鐘，-20℃ 2小時，-80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮?。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作實驗步驟：

1. 原代細胞分離

?組織獲取?：采用成年SD大鼠，快速取出海馬或脊髓組織，置于低溫人工腦脊液（0-4℃）中保存?。

?消化與離心?：使用木瓜蛋白酶消化組織，通過Optiprep不連續(xù)梯度離心，收集組織細胞密集帶?。

?細胞培養(yǎng)?：將細胞懸液接種于含B27添加劑和堿性成纖維細胞生長因子2（FGF-2）的培養(yǎng)基中，置于37℃、5% CO2孵箱中培養(yǎng)?。

2. 細胞純化

?差速貼壁法?：通過搖床分離（200r/min去除小膠質(zhì)細胞，280r/min收集少突前體細胞）?。

?免疫磁珠分選?：利用NG2抗體標記后通過磁珠分選，提高純度?。

3. 細胞傳代與凍存

?傳代?：使用含EDTA和DNase I的消化液處理細胞，按1:3比例傳代?。

?凍存?：將細胞重懸于凍存液（含10% DMSO和90%胎牛血清），程序降溫后保存于液氮中?。

4. 功能驗證

?免疫熒光染色?：檢測NG2、GFAP等標志物表達，確認細胞純度?。

?電生理記錄?：通過膜片鉗技術檢測細胞電特性（如鈉電流）。