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原代細(xì)胞
大鼠原代細(xì)胞
YS-01X7079大鼠頜下腺上皮細(xì)胞規(guī)格





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ARTICLES商品屬性:

產(chǎn)品名稱 | 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞規(guī)格 | 英文名稱 | Rat Submandibular Gland Epithelial Cells |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5 | 貨號(hào) | YS-01X7079 |
產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞
組織來(lái)源 頜下腺組織
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞簡(jiǎn)介 大鼠頜下腺上皮細(xì)胞分離自頜下腺組織;頜下腺是下頜部的唾液腺,左右各一個(gè)。頜下腺屬于唾液腺的一種,主要的功能就是分泌唾液。機(jī)體共有三大唾液腺,包括腮腺、頜下腺及舌下腺。頜下腺位于下頜骨的下方,接近下頜骨彎曲角附近,所以也叫下頜下腺(下頜骨下方的唾液腺),左右各一,由舌下舌系帶兩側(cè)處伸出頜下腺排泄管,主要分泌黏液和漿液狀性質(zhì)的唾液。頜下腺上皮細(xì)胞是一種高度分化的上皮細(xì)胞,在體外難以長(zhǎng)期存活和保持分化狀態(tài);頜下腺的主要病理變化有:①頜下腺炎;②頜下腺囊腫;③頜下腺腫;④頜下腺結(jié)石。
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠頜下腺上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10? cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠頜下腺上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:

自備試劑:0.25%、鼠尾膠原蛋白Ⅰ型(1×)或鼠尾膠原蛋白Ⅰ型(1mg/mL)、PBS、培養(yǎng)基
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:大鼠頜下腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基(含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等)
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
傳代比例:1:2
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
原代細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
?
取材與預(yù)處理?:取新生24小時(shí)內(nèi)Wistar大鼠,麻醉后無(wú)菌取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管?。
?消化?:剪碎肺組織,依次用0.2%膠原酶(37℃震蕩1h)和0.5%酶(消化30min)消化,終止后過(guò)濾?。
?純化?:采用IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后重懸接種?。
?培養(yǎng)?:使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液?。
培養(yǎng)方法?:
?
原代細(xì)胞培養(yǎng)?
?材料?:新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基(含10%胎牛血清)。
?步驟?:
取出肺組織,PBS沖洗去除血管和氣管,剪碎。
依次用膠原酶(37℃震蕩1h)和酶(消化30min)消化,終止后過(guò)濾。
通過(guò)IgG吸附法去除未貼壁細(xì)胞,離心后接種于培養(yǎng)皿。
37℃、5% CO?培養(yǎng),24小時(shí)后換液。
?注意事項(xiàng)?:消化時(shí)間需嚴(yán)格控制(胎鼠25分鐘,新生鼠40-60分鐘),避免過(guò)度消化導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?
?傳代?:0.25%消化1-2分鐘,加入含血清培養(yǎng)基終止,按1:2-1:4比例傳代。
?條件?:DMEM+10%胎牛血清,每周換液2-3次,37℃、5% CO?培養(yǎng)。
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