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產品中心

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當前位置:首頁產品中心天然蛋白、重組蛋白真核蛋白/EP嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPX)真核蛋白

嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPX)真核蛋白
產品簡介

嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPX)真核蛋白的相關產品:類胰(TPS)重組蛋白英文名稱:Recombina Tryptase (TPS)類胰(TPS)重組蛋白英文名稱:Recombina Tryptase (TPS)ⅡD組磷脂meiA2(PLA2G2D)重組蛋白英文名稱:Recombina Phospholipase A2, Group IID (PLA2G2D)

更新時間:2023-03-22
廠商性質:經銷商
訪問量:545
產品型號:
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公司產品僅供科研使用,不得用于臨床!

產品名稱

英文名稱

物種

嗜酸性粒細胞過氧化物酶(EPX)真核蛋白

Eukaryotic Eosinophil Peroxidase (EPX)

Mus musculus (Mouse,小鼠)

商品介紹:

EPO; EPP; EPX-PEN; EPER

酶與激酶

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:真核表達

宿主CHO Cell

內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::細胞質

預測分子量:33.4kDa

實際分子量:66kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Gln19~Arg300 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:9.7

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg   

蛋白表達及純化:

1.培養500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


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注意事項:

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續操作。

4、本產品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1. 貼壁培養的細胞,吸去培養基后,加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次,每次振搖數次以盡量去除培養液;

2. 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

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應用類型: Other英文名稱: ALDH1L1英文別名: AL1L1_HUMAN; Cytosolic 10-formyltetrahydrofolate dehydrogenase; Aldehyde dehydrogenase family 1 member L1; FTHFD; EC:1.5.1.6; 10-FTHFDH; FDH; 10-fTHF;

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