產(chǎn)品名稱：丙酮酸（PA)含量測試盒說明書

規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣

測試方法:微量法、可見分光光度法

貨號：YS-01S6455

測定意義

丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝，起著重要的樞紐作用。

測定原理：

丙酮酸與2,4-二硝基肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝基腙，在堿性溶液中呈櫻紅色。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。

【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

操作步驟:

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內(nèi)配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。

特點:

(1)應用廣泛

由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。

(4)準確度高

對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預富集后)。

(6)分析成本低、操作簡便、快速

Anti-NEP/FITC 熒光素標記腦啡肽酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse Anti-human VEGF/FITC 熒光素標記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗體 Anti-ANGPTL1/ANG-1 0.2ml

Mouse Anti-human IgG/Cy3 Cy3標記的小鼠抗人IgG 0.1ml

GALNT1 英文名稱： 多肽N-乙酰基半乳糖轉(zhuǎn)移酶1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh procollagen type IIA Ⅱ型膠原α1抗體 規(guī)格 0.2ml

Mouse Anti-human VEGF/FITC 熒光素標記小鼠抗人VEGF單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

PIWIL1(piwi-like 1) piwi 樣1蛋白(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CD68 CD68抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh p150 CAF1 染色質(zhì)組裝因子1P155抗體 規(guī)格 0.2ml

SCGN Kit Human 人 SCGN / Secretagogin ELISA配對抗體 ELISA

TUG 英文名稱： 腺泡狀軟組織肉瘤結構域蛋白ASPC抗體 0.2ml

CEND1 英文名稱： 細胞周期通道和神經(jīng)細胞分化蛋白1抗體 0.2ml

Anti-CD68 CD68抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Salmonella enteritidis H 英文名稱： 傷寒沙門氏菌鞭毛抗原H抗體 0.2ml

ETS1 英文名稱： Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗體 0.1ml

蛋白激酶A抗體 Anti-PKA 0.1ml

Anti-STAT4 /FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-MYF5 (phospho Ser49) 磷酸化生肌決定因子Myf5抗體 規(guī)格 0.1ml

GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
丙酮酸（PA)含量測試盒說明書溴氯酚藍鈉鹽升麻素蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印印跡膜麗春紅（Ponceau S）染色試劑盒

溴酚藍鈉鹽類葉升麻苷麗春紅（Ponceau S）溶液

溴酚紅鈉異類葉升麻苷組化HRP－TMB底物顯色試劑盒

硬脂酸丁酯(>98%，BR)松果菊苷印跡HRP－TMB底物顯色試劑盒

C10E6，10%溶液5-O-甲基維斯阿米苷印跡超敏型HRP－TMB底物顯色試劑盒

C12E10，10%溶液異土木香內(nèi)酯組化超敏型HRP－TMB底物顯色試劑盒

C12E9, 10%溶液鹽酸藥根堿通用型HRP－AEC底物顯色試劑盒

無水氯化鈣(>96%,Tech Grade)白屈菜紅堿增強型HRP－AEC底物顯色試劑盒