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當前位置:首頁產品中心天然蛋白、重組蛋白重組蛋白/RP線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白

線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白
產品簡介

線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白的相關產品:基質金屬3(MMP3)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)基質金屬3(MMP3)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)基質金屬3(MMP3)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metallopro

更新時間:2023-03-22
廠商性質:經銷商
訪問量:339
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商品介紹:

dNT-2; dNT2; mdN; 5'(3')-deoxyribonucleotidase, mitochondrial

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::n/a

預測分子量:25.9kDa

實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Val38~Cys228 with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:-

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產品僅供科研使用,不得用于臨床!

產品名稱

英文名稱

物種

線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白

Recombinant 5'-Nucleotidase, Mitochondrial (NT5M)

Homo sapiens (Human,人)

蛋白表達及純化:

1.培養500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


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操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1. 貼壁培養的細胞,吸去培養基后,加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次,每次振搖數次以盡量去除培養液;

2. 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

GPR180產品名稱: G蛋白偶聯受體GPR180蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

TRF41產品名稱: DNA聚合meiΚ抗體交叉反應: Human, Mouse, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

CYP1A2產品名稱: CYP1A2單克隆抗體交叉反應: Human

VCAM1產品名稱: 內皮細胞粘附分子(CD106)抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit, Sheep

BMP8b產品名稱: 骨形態發生蛋白8b抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep

OA1產品名稱: 眼部白化相關蛋白OA1/蛋白偶聯受體143抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

DNAJC22產品名稱: DNAJC22蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Horse

PSF2產品名稱: PSF2蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig

應用類型: Other英文名稱: PDHA1英文別名: Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, somatic form, mitochondrial; ODPA_HUMAN; EC:1.2.4.1; PDHE1-A type I; pyruvate dehydrogenase E1 subunit alpha 1; PDHA; PDHAD; PHE1A; E1alpha; PDHCE1A; PDH-E1α;

GABRA5產品名稱: γ1受體α5/GABRα5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Horse, Rabbit   

線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白T-細胞可誘導共刺激分子(ICOS)ELISA試劑盒ICOST-細胞可誘導共刺激分子elisa檢測試劑盒Human Inducible T-Cell Co Stimulator(ICOS)ELISA Kit

T-框蛋白6(TBX6)ELISA試劑盒TBX6T-框蛋白6ELISA試劑盒Human T-Box Protein 6(TBX6)ELISA Kit

T-框蛋白5(TBX5)ELISA試劑盒TBX5T-框蛋白5elisamei聯免疫試劑盒Human T-Box Protein 5(TBX5)ELISA Kit

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T-框蛋白3(TBX3)ELISA試劑盒TBX3T-框蛋白3elisa kitHuman T-Box Protein 3(TBX3)ELISA Kit  
注意事項:

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續操作。

4、本產品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作 

 


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