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血清標本越新鮮越好：
1、制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。
2、如有細菌污染，菌體中或許富含內源性HRP，也會發生假陽性反應。
3、如在冰箱中保存過久，其間可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。
4、血清標本可按慣例方法搜集，應留心避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為符號的ELISA測定中，溶血標本或許會添加非特異性顯色。
5、在5天內測定的血清標本可放置于4℃，逾越一星期測定的需低溫冰存。
6、凍住血清融解后，蛋白質有些濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上激烈振蕩。

      可以說在ELISA試劑盒操作中，洗滌是主要的關鍵技術，因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，為達到分離游離的和結合的酶標記物的目的，清除殘留在板孔中游離的物質，以及非特異性地吸附的干擾物質，在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來，所以在洗板時會有一定誤差，人為因素很大，洗的不*或串了孔，對實驗結果將產生很大的影響，所以一定要小心。